1、指代不同。叔叔在古代詞語中稱父親的二弟爲“叔父”，稱父親的弟媳爲“叔母”，稱丈夫的弟弟爲“叔叔”。伯伯可以稱比自己父親年紀大的男性長輩，或對朋友父親的尊稱，如“世伯”。“伯伯”、“阿伯”亦是對一般中老年男性的稱呼。
2、用法不同。叔叔稱父親的弟弟，女性對其丈夫的弟弟的稱呼。伯伯一般叫父親的哥哥，伯伯是一個親屬稱謂，指父親的哥哥，也叫伯父或阿伯，或簡稱伯。
3、性質不同。叔叔聽起來年輕，如今在外面稱呼年紀大的人爲叔叔，叔叔已經成了一種敬稱。稱伯伯顯得老，對於比自己父親年紀大的人的禮貌稱呼。
區別就是:一是輩分不同，叔伯就是自己父親的哥哥和兄弟，和叔公則是自己爺爺的兄弟。
二是叫法不同。假設自己父親弟兄四個，並且父親是老二，那麼可以稱呼叔伯們爲:大伯，三叔，四叔。而叔公則是爺爺的弟弟們。假設爺爺有弟兄五個，並且爺爺是老大，則稱叔公們爲:二爺，三爺，四爺，五爺。
