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taqman探針設計原理

心理 閲讀(1.34W)
taqman探針設計原理

其基本原理是PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。

開始時,探針完整地結合在DNA任意一條單鏈上,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收,檢測不到熒光信號PCR擴增時,Taq酶的5'-3'核酸外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而發出熒光,切割的熒光分子數與PCR產物的數量成正比,因此,通過檢測PCR反應體系中的熒光強度可以達到檢測PCR產物擴增量的目的。