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原位杂交技术的优缺点

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原位杂交技术的优缺点

原位杂交技术有以下几点优势:①安全、快速、灵敏度高②探针能较长时间保存③多色标记,简单直观④可用于中期染色体及间期细胞的分析⑤可应用于新鲜、冷冻或石蜡包埋标本以及穿刺物和脱落细胞等多种物质的检测。

原位杂交就是用核酸探针与基因组DNA或RNA进行碱基互补配对,在组织的原位标记目标DNA或RNA,核酸探针事先用同位素标记,因为标记物为同位素所以容易检测灵敏度高,但是同位素嘛你知道的,对人有害。

荧光原位杂交原理同上,但是标记物为荧光,对人无害,但是灵敏度不高。多彩荧光原位杂交技术也是一样,只不过采用了几种不同颜色的荧光素标记不同的探针,一次杂交可以检测多种目的基因。

因为荧光的灵敏度不如同位素高,为了提高灵敏度,就有了原位PCR。原位PCR的原理是,在基因组DNA或RNA的原位,进行PCR,使用的引物事先用荧光素标记,所以扩增出来的目的基因片段都带有荧光素,使得检测的灵敏度大幅提高。